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植物Elisa试剂盒采血试管洗涤不彻底、反复使用易交叉污染

点击次数:375 发布时间:2018-09-25

1.植物Elisa试剂盒标本及采集、贮运因素:
①严重溶血:以HRP为标记的ELISA测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性;
②混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净
③如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应;
④植物Elisa试剂盒标本凝固不全,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在植物Elisa试剂盒测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;
⑤植物Elisa试剂盒采血试管洗涤不彻底、反复使用易交叉污染
⑥塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
2.植物Elisa试剂盒之操作技术的影响:
①植物Elisa试剂盒应保证清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。
②合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
③植物Elisa试剂盒加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
④用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
⑤显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。 

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