招聘服务

Products

产品中心

联系我们
Contact us

more
首页>技术文章>大鼠IL-27 ELISA kit(实验类型:夹心法)

技术文章 Article

大鼠IL-27 ELISA kit(实验类型:夹心法)

点击次数:268 发布时间:2018-09-17


大鼠IL-27 ELISA kit(实验类型:夹心法)

大鼠白细胞介素27(IL-27)ELISA试剂盒实验目的

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠白细胞介素27(IL-27)的含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8℃

 

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠白细胞介素27(IL-27)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠白细胞介素27(IL-27)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 

大鼠白细胞介素27(IL-27)ELISA试剂盒组成

试剂盒组成96孔配置48孔配置备注
微孔酶标板8孔×12条8孔×6条 无
标准品0.3mL×6管0.3mL×6管
样本稀释液6mL3mL
检测抗体-HRP10mL5mL
20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
终止液6mL3mL
封板膜2张2张
说明书1份1份
自封袋1个1个

备注:

1. 标准品浓度依次为:80、40、20、10、5、0 pg/mL

2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

 

样本处理及要求

1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

 

需要而未提供的试剂和器材

1. 酶标仪(450nm)

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

 

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

 

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

 

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

 

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

Elisa试剂盒标准曲线图

(此图仅供参考)

 

 

大鼠白细胞介素27(IL-27)ELISA试剂盒性能

1. 检测范围:2.5 pg/mL – 80 pg/mL。

2. 灵敏度:最低检测浓度小于0.1 pg/mL。

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15%

返回

网站首页/关于我们

新闻动态/技术文章

产品中心 /荣誉与资质

在线留言/联系我们

白介素6(IL6)ELISA试剂盒(种属:鱼)

鸡膜联蛋白A5(ANXA5)ELISA试剂盒

鸡免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒

小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒

小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒

小鼠载脂蛋白A4(apo-A4)ELISA试剂盒

小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒

小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒

小鼠维生素D2(VD2)ELISA试剂盒

小鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒

小鼠维生素B12(VB12)ELISA试剂盒

小鼠维生素A(VA)ELISA试剂盒

联系地址:上海市杨浦区铁岭路32号1519-10室

固定电话:021-60346444

移动电话:17302193538

在线客服
电话
021-60346444
手机
17302193538
友情链接:极速时时彩开奖直播  75秒极速时时彩  极速时时彩官网  极速时时彩计划网页版  极速时时彩官方网站  极速时时彩在线计划  极速时时彩官方网站  75秒极速时时彩  极速时时彩开奖直播  极速时时彩开奖结果  极速时时彩  极速时时彩官方网站  苹果彩票  75秒极速时时彩  75秒极速时时彩  极速时时彩开奖直播  极速时时彩开奖直播  极速时时彩人工计划  极速时时彩开奖结果  极速时时彩开奖直播历史记录  极速时时彩计划网页版  极速时时彩  极速时时彩官方网站  极速时时彩人工计划  极速时时彩娱乐  极速时时彩娱乐  极速时时彩计划  极速时时彩走势图  极速时时彩官方网站  极速时时彩开奖结果  极速时时彩娱乐平台  极速时时彩官网  极速时时彩开奖结果  极速时时彩开奖直播历史记录  极速时时彩官方网站  极速时时彩  极速时时彩  极速时时彩  极速时时彩开奖直播  极速时时彩人工计划  极速时时彩人工计划  极速时时彩开奖结果  极速时时彩开奖结果  极速时时彩开奖结果  极速时时彩官网  极速时时彩官方网站  极速时时彩官方网站  极速时时彩开奖直播  极速时时彩开奖直播历史记录  极速时时彩开奖结果  极速时时彩开奖直播  极速时时彩计划网页版  极速时时彩官方网站  极速时时彩开奖直播  极速时时彩  极速时时彩开奖直播  极速时时彩走势图  极速时时彩开奖号码  极速时时彩开奖直播  极速时时彩群  极速时时彩官方网站  75秒极速时时彩  极速时时彩官方网站  极速时时彩官方网站  极速时时彩计划网页版  极速时时彩开奖号码  极速时时彩官网  极速时时彩娱乐  极速时时彩开奖记录  极速时时彩娱乐平台  75秒极速时时彩  极速时时彩开奖号码  极速时时彩官方开奖  极速时时彩官方网站  极速时时彩走势图  极速时时彩官方网站  极速时时彩官方网站  极速时时彩开奖记录  极速时时彩娱乐  

免责声明: 本站资料及图片来源互联网文章,本网不承担任何由内容信息所引起的争议和法律责任。所有作品版权归原创作者所有,与本站立场无关,如用户分享不慎侵犯了您的权益,请联系我们告知,我们将做删除处理!